2005年，于娜与黄晓明、印小天、姜华联袂主演了时尚爱情剧《女才男貌》，并在剧中饰演了女主角善良坚强且心怀梦想的女主角谈孤鸿；随后，于娜又与柳云龙、王奎荣、王华合作主演了根据同名小说改编的谍战悬疑剧《暗算》的第三部《捕风》，并在剧中饰演了美丽热辣的国民党女军官唐一娜；同年，于娜还与高发、刘红雨、潘耀武共同出演了现代警匪剧《心戒》；此外，于娜还出演了广播剧《那些花儿》并推出了首支个人单曲《陪你玩》 。
2006年，于娜与王杰、谭耀文、陆毅联袂主演了都市运动剧《高手》，并在剧中饰演了美丽的高球宝贝崔丽娜；之后，于娜又与成泰燊、萨日娜、李万年合作主演了现代情感剧《母亲是条河》，于娜在剧中饰演了母亲角色叶秀，这也是于娜首次饰演母亲角色；同年，于娜还与修庆、于荣光、米学东共同主演了刑侦悬疑局《第七座墓志铭》
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