香菇多糖提取工艺流程图 香菇多糖提取 ***( 六 )


食用菌多糖的提取 *** 有水提法、碱提法和酶提法等,其中酶提法是利用酶对细胞结构的破坏作用,使存在于细胞内部的多糖释放出来,从而提高了多糖的得率 。
本次实验采用纤维素酶和果胶酶对紫蘑菇进行水解,研究香菇多糖的更佳提取工艺,并探讨蘑菇粒度、蘑菇溶解 *** 以及酶法提取中多糖提取效果的评价 ***。
可以同步做三组对比试验:⑴采用水提,不加酶;⑵采用酶法提取;⑶采用酶空白(只加酶,不加蘑菇粉) 。
由于酶中也含有少量的糖类成分,其存在将会对蘑菇多糖的提取产生影响 。因此,在计算酶法提取多糖的效果时,要减去酶本身所引入的糖 。在确定更佳酶浓度时更要考虑 。
一、实验流程:蘑菇干燥→粉碎过筛→加水浸泡0.5h→调PH→加入纤维素酶→提取→离心过滤→测多糖提取率
式中:n一提取液稀释倍数;
C一提取液中多糖的浓度(mg/mL);
V一提取液体积(mL);
m一蘑菇的质量(mg)。
测定时取三个平行样,结果数据为平行样的平均数值 。
二、具体实验步骤:
1、多糖标准曲线的绘制
精密称取105℃干燥恒重的葡萄糖标准品100mg,置于100 mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀 。精密吸取0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4、2.8 mL分别置于50 mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀 。精密吸取上述各种溶液2.0 mL,分别加入5%苯酚溶液1.0 mL,摇匀,迅速加入5.0 mL浓 *** ,振摇5min,置沸水浴上加热15 min,然后置冷水浴中冷却30 min,随行空白,在490 nm波长处测定吸光度 。以标准溶液浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标绘制标准曲线,并计算其标准曲线回归方程 。
(1)精密度试验:精密吸取1.0 ml供试液按“标准曲线的制备”项下操作,分别测定吸光度,求得RSD 。
(2)重现性及多糖含量测定:精密称取巴西蘑菇多糖0.1000g,按“供试液的配制”和“标准曲线的制备”项下操作,分别测定吸光度,求得多糖的平均含量,及RSD值
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