文章插图
该法是将已熔化并冷却至约50℃(减少冷凝水)的琼脂培养基,先倒入无菌培养皿中,制成无菌平板 。待充分冷却凝固后,将一定量(约0.1?ml)的某一稀释度的样品悬液滴加在平板表面,再用三角形无菌玻璃涂棒涂布,使菌液均匀分散在整个平板表面,倒置温箱培养后挑取单个菌落 。
【稀释涂布平板法是什么?】计数时,首先将待测样品制成均匀的系列稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使成单个细胞存在(否则一个菌落就不只是代表一个细胞),再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内 。
微生物平板涂布法有以下注意事项:
1、整个过程需要保证在无菌条件下进行 。试管、枪头等仪器设备都需要提前经过灭菌环节才可以使用 。
2、接种环使用前应当在酒精灯上灼烧至红热,以保证灼烧充分 。
3、蘸取少量菌液,先在培养皿上划第一条,注意不要转动接种环 。
4、在稀释过程中要充分混匀,吸取100ul到平板上,然后用烧好的涂布棒均匀涂抹开,各个方向都可以涂布,涂布完灼烧 。
浇注平板法又称为稀释倒平板法,与涂布平板法的主要区别如下:
一、方法不同
1、稀释倒平板法:先将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养 。在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落 。
2、涂布平板法:首先将待测样品制成均匀的系列稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使成单个细胞存在(否则一个菌落就不只是代表一个细胞),再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内 。经培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可计算出样品中的含菌数 。
二、优势不同
1、稀释倒平板法:便于计数,便于观察菌落特征 。
2、涂布平板法:便于观察菌落特征,对混合菌进行分离 。
三、劣势不同
1、稀释倒平板法:吸收量较少,平板不干燥效果不好,易蔓延 。
2、涂布平板法:不能准确计数 。
参考资料来源:
百度百科-稀释倒平板法
百度百科-涂布平板法
稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落,即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法,即一个菌落代表一个单细胞 。
计数时,首先将待测样品制成均匀的系列稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使成单个细胞存在(否则一个菌落就不只是代表 一个细胞),再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内 。经培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可计算出样品中的含菌数 。
稀释涂布平板法注意事项
稀释涂布平板法是将菌液稀释成不同浓度,进行涂平板 。平板划线法,是调单个菌落在平板上进行划线 。两种方法都可以得到独立的菌株 。稀释涂布平板法一般多用于筛选菌株,平板划线法一般多用于纯化菌株 。
微生物学实验中的一种操作方法 。由于将含菌材料现加到还较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡,而且采用稀释倒平板法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长,因此在微生物学研究中更常用的纯种分离方法是稀释涂布平板法 。
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