文章插图
可以 。
如果二抗是小鼠来源 , 那二抗就买抗小鼠的即可(羊、兔等均可) 。二抗标记物的选择有HRP、Biotin、荧光素等标记物 。一般SP三步法二抗选择Biotin标记的二抗 , 以与后面的SP结合反应 , 而免疫荧光染色就需要购买不同荧光素标记的二抗 , 如罗丹明、FITC、Cy3等常用荧光素 。
第一抗体就是平常所说的抗体 , 即能和抗原特异性结合 。第二抗体是能和抗体结合的 , 即抗体的抗体 。主要用于检测抗体的存在 。一抗是针对抗原的抗体 , 二抗是针对一抗的抗体 。即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体 。
【一抗的种属来源】
二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源 , 例如:如果你的一抗是小鼠源的单克隆抗体 , 二抗则选抗小鼠的二抗(山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可);如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体 , 则相应的二抗需要选择抗兔的二抗 。
即根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗 。艾美捷能为您提供最全的抗不同种属的原装进口二抗 , 包括抗小鼠、大鼠、兔、山羊、绵羊、人、豚鼠、猪、马、牛、鸡、鸭等二抗 。
【二抗的种属来源】
一般来说 , 不同的种属来源与二抗的质量没有必然的联系 , 来源于山羊的二抗与来源于驴的二抗在一般的实验里没有太多的差别 。
然而在一些特殊的实验里 , 如双标实验里 , 如果其中一个一抗是山羊来源的 , 一个是小鼠来源的 , 则相应的二抗分别要抗山羊和抗小鼠的二抗 , 这时候 , 二抗就不能选择山羊或者小鼠来源的 。艾美捷有相应的驴来源的二抗 , 非常适合做类似双标的免疫实验 。
如何选择二抗——根据一抗种属及类型选择合适的二抗
【一抗的种属来源】
二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源 , 例如:如果你的一抗是小鼠源的单克隆抗体 , 二抗则选抗小鼠的二抗(山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可);如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体 , 则相应的二抗需要选择抗兔的二抗 。即根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗 。艾美捷能为您提供最全的抗不同种属的原装进口二抗 , 包括抗小鼠、大鼠、兔、山羊、绵羊、人、豚鼠、猪、马、牛、鸡、鸭等二抗 。
【一抗的类别亚型】
二抗需与一抗的类别或亚类相匹配 。这通常是针对单克隆抗体而言 。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白 , 因此相应的二抗就是抗IgG抗体 。其中单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品说明书中都会有描述 , 如果你的一抗是小鼠IgM , 那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM 。如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类(IgG1 , IgG2a , IgG2b , IgG3) , 那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合 , 或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗 , 例如 , 如果你的一抗是小鼠IgG1 , 那么你可以选择抗IgG1的二抗 , 此种抗体在双标记实验中尤其适合 。在不清楚一抗为何种类/亚类的情况下 , 可以选用抗相应物种IgG 。
【二抗的种属来源】
一般来说 , 不同的种属来源与二抗的质量没有必然的联系 , 来源于山羊的二抗与来源于驴的二抗在一般的实验里没有太多的差别 。然而在一些特殊的实验里 , 如双标实验里 , 如果其中一个一抗是山羊来源的 , 一个是小鼠来源的 , 则相应的二抗分别要抗山羊和抗小鼠的二抗 , 这时候 , 二抗就不能选择山羊或者小鼠来源的 。有相应的驴来源的二抗 , 非常适合做类似双标的免疫实验 。
【二抗的耦联标记】
一般来讲 , 耦联到二抗上的探针主要有酶(辣根过氧化酶HRP和碱性磷酸酶AP或其衍生物APAAP , PAP) , 荧光基团(FITC、 Rhodamine、Texas Red、PE、Rhodamine、Dylight等)、生物素、金颗粒 。选用哪种探针的二抗主要取决于具体的实验 。对于Western Blot和ELISA , 最常用的二抗是酶标二抗;
【兔二抗和属二抗能混合吗】【是否经过血清吸附过的二抗】
如您的检测样本是人源的蛋白 , 一抗是小鼠源的单克隆抗体 , 二抗就需要选择抗小鼠源的二抗 。
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