近年来黄瓜育种工作进展很快,出现了许多高产优质、抗病性强的新品种 。黄瓜是喜温性植物,温度过高或过低常常导致其授粉受精作用不良,进而影响产量和育种工作的顺利进行 。为了解决在配制黄瓜杂种一代品种中发生的父本、母本花期不遇和杂种一代纯度偏低等问题,成武县蔬菜局对黄瓜花粉在适宜的培养基上,花粉不同发育时期的萌发情况及花粉耐贮性进行了研究,从而为了解其授粉的最佳时机和花粉的耐贮性提供了可靠的依据和方法 。一、材料和方法测试材料
【黄瓜花粉萌发的实验】
[/div](1)以天津市黄瓜研究所培育成功的一代黄瓜杂交种“金燕3号”的开花植株为试验材料 。
(2)主要试剂为15%蔗糖溶液和100mg/kg硼酸溶液 。
(3)主要仪器:电子显微镜、双凹载玻片、培养皿、镊子、干燥器、冰箱、分析天平 。
(4)溶液的制备用15毫克蔗糖和+0.1毫克硼酸制备100毫升培养基 。测试方法
[/div](1)花粉收集当天早上采摘盛开的黄瓜雄花,取出花药放入烘干机中3-4h,然后取出,用镊子将花粉散开,挑出杂质 。
(2)花粉贮藏将获得的花粉分成两部分,在不同条件下贮藏 。【div】[/div]
①通常在室温下保存,一部分花粉在室温下保存在指管中 。【div】[/div]
②低温保存,将其他花粉放入指管保存在冰箱中,温度控制在4℃左右 。
(3)花粉萌发的液体培养基为15%蔗糖+100mg/kg硼酸 。将培养基用高压灭菌器灭菌20分钟,然后将3-4滴培养液滴入无菌室的双凹滑槽中,用刷子在培养液表面蘸取少许花粉(注意不要搅拌,以防混合在液体中的花粉因缺少空气体而影响其萌发,由于花粉深度不同,光折射不易在显微镜下观察到) 。同温处理培养2 ~ 3小时,显微镜下检查,记录其发芽率,比较其发芽能力 。
[/div]白天,随着时间的推移,温度和花龄都发生变化,即温度由低变高,花龄由幼变强 。从图1可以看出,采花当天花粉萌发有两个高峰期,即上午和下午16: 00左右,中午 。因此,人工授粉后,将载玻片放入底部有少量蒸馏水的培养皿中(注意不要让水通过载玻片),盖上培养皿,放在室内2 ~ 3小时,在10×10倍电子显微镜下检查三个不重叠的视野 。将花粉管长度超过花粉直径的花粉视为萌发花粉,统计花粉总数和萌发花粉数,进而计算花粉发芽率 。
(4)花粉耐贮性从采集花粉那天起,就对花粉进行培养,并考察其发芽率 。二.结果和分析
1采花当天贮藏温度和时间对花粉萌发率的影响应分别在8: 00、12: 00和16: 00均匀撒在培养基上,而不是采花当天上午6-10点和下午16: 00左右,应
2采后花粉生活力的变化
然后,研究人员在每天早上8: 00观察花粉生活的变化规律 。从表1可以看出,随着时间的推移,花粉的发芽率和伸长量都在下降,这也说明储存的花粉应尽早使用 。
[/div]3不同贮藏条件和贮藏天数对黄瓜花粉萌发的影响 。从采花当天开始,每天8: 00取花粉,在不同温度下同时间培养,观察比较其发芽率 。
[/div]]结果表明,黄瓜花粉粒的萌发率在采花当天最高,且随着贮藏天数的增加,萌发率逐渐下降,贮藏第2天生活力保持较高,但常温贮藏的花粉在第3天萌发率明显下降,低温贮藏的花粉在第3天萌发率略低于第2天 。黄瓜花粉的寿命极短,但在低温冰箱中保存时,花粉粒的萌发能力会持续很长时间 。因此,为了授粉时花粉充足、旺盛,可在授粉日上午采摘雄花,直接用于授粉 。如果这个花期父母不见面,由于开花前一天花粉粒成熟,有萌发能力,可以在开花前一天下午采摘黄色的雄花芽,放入塑料袋或纸袋中密封保存,适宜温度为18 ~ 20℃ 。根据Hayase 1961年关于贮藏温度和湿度对黄瓜花粉开花后萌发影响的研究,黄瓜花粉在10℃和高湿度条件下贮藏,萌发能力可持续较长时间 。第三部分 。讨论和总结
1黄瓜花粉萌发在15%蔗糖+100mg/kg硼酸的液体培养基上具有较高的萌发能力 。但为了防止花粉萌发时花粉粒破碎,在培养基的配制中应加入少量的Ca2+进行保护 。因此,液体培养基适合黄瓜花粉萌发 。
2一般来说,黄瓜花粉的寿命很短,并且在低温下保存,开花后的花粉可以长时间保持其活力 。因此,开花后应及时进行人工辅助授粉,选择合适的授粉时间 。
3要想建立一套完整的黄瓜花粉适宜萌发条件和生活力持续时间的实验,必须有合适的实验方法,并利用这种方法来研究生理学、生物化学、遗传等基础理论 。,这也有利于培育和稳定新的杂交类型,也可以结合诱变育种加速育种进程 。本试验作为黄瓜生殖生长期的试验之一,测定了黄瓜花粉在不同温度下贮藏和室温下培养的发芽率,解决了育种工作中的一些问题 。遗传背景与其他生长期之间的相关性的实验尚待在这种方法的基础上进行讨论 。
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