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二抗的优点，标记二抗有何优点

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二抗的优点，标记二抗有何优点

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二抗标记各显什么颜色：
二抗的优点，标记二抗有何优点

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流式里二抗的颜色一般就红绿两种 ， 要根据你机器的激发光波长来决定用哪种二抗了
western blot 为什么要用二抗?直接标记一抗不行吗？：
之所以用二抗 ， 是因为二抗是带有酶标的抗体 ， 它跟一抗结合之后可以曝光显影 。如果你的一抗上面直接带有酶标物 ， 那可以不用二抗直接曝光 。但是一般你的一抗都是少数应用的 ， 厂家不会大批量生产 ， 就不会费劲给它加酶标 。
只要是HRP标记的二抗都能做DAB显色吗？：
不能 。
biotin标记二抗能加叠氮化钠吗：
生物素是没有荧光的 ， 但是亲和素能与生物素结合 ， 故荧光标记的亲和素能结合生物素并被激发出荧光 。
蛋白质印迹法中为什么不直接在1抗中作标记而在2抗中作标记 ， 这不是多此一举么？望高手指点！先谢过了！：
【二抗的优点，标记二抗有何优点】是这样的：如果一抗上直接加标记 ， 不但不能保证抗体抗原反映的特异性 ， 也不能保证实验的可重复性 。
首先 ， 由于抗体都是人工去设计的 ， 对于一个人工设计的蛋白质来说 ， 你可以设计一个很好的抗体与他结合；然而对于天然蛋白质 ， 你不能保证一个很高的识别率和准确度 。所以 ， 针对1抗 ， 我们可以设计出完美的2抗 ， 然而针对原蛋白质 ， 你无法设计一个特别完美的1抗 。所以 ， 直接标记1抗的出来的结果是不准确的 ， 而标记2抗是相对于1抗直接标记来说更准确的 ， 所以经过大量的实验之后人们抛弃了直接标1抗的方法 。当然 ， 标2抗也不是完全完美的 ， 当然你也可以标3抗 ， 4抗 ， 不过那个成本就指数上升了 ， 在保证一定的置信度的情况下 ， 人们一般标到2抗就够了 。
其次 ， 对于同一个抗原 ， 不同来源的1抗所识别的位置可能会有很大差异 。这样 ， 你就无法保证试验的可重复性 。而1抗作为抗原来讲 ， 可以将它的抗原决定簇设计的一样 ， 这样针对不同的1抗 ， 2抗是可以保证差不多一个样子的 。而且这也给节约成本和方便标记带来了方便 。
所以一般现在都是2步标记 ， 第一个原因是主要的 ， 第二个原因是次要的 。希望对你有帮助 。

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