文章插图
要 。
1、磷酸盐流动相要超声脱气并用至少0.45um的滤膜抽滤干净，防止产生气泡和液相系统管路堵塞；
2、运行过程中要开启活塞杆冲洗功能，防止磷酸盐盐析导致活塞杆被磨损；
3、跑完样品后要先用大比例的水相冲洗系统管路和色谱柱，防止残留的磷酸盐盐析导致管路和色谱柱堵塞，最后再用高比例的有机相封存系统管路和色谱柱 。
三羟甲基羟基甲烷气体(Tris)为碱性，化学式为C4H11NO3，含量为121.14，在25°C下pKa为8.1，其缓冲液的合理缓冲范围在pH7.0~9.2中间 。在细胞生物学试验中常见的pH数值6.8、7.4、8.0、8.8 。Tris被普遍用以细胞生物学和生物学试验中的缓冲液的制取，乃至有超出磷酸盐缓冲液的发展趋势 。
磷酸盐缓冲液(PBS)是以磷酸盐为pH缓存，氧化钠为渗透浓度均衡的溶液，一般 应用的有倍他米松缓冲液和磷酸钾缓冲液 。因为他们有二级离解，缓存的pH值范畴很广，是细胞生物学科学研究中应用更为普遍的一种缓冲液 。
2.配备方式
配置Tris-HCl缓冲液的方式有二种：各自配置Tris和HCl水溶液，随后按常见表格中列出容积混和就可以 。可是因为规范浓度值的稀盐酸不容易配置，因此 常见另一种方式：以配备Tris-HCl缓冲液为例子：先将Tris碱溶解950mL～970mL双蒸水中，边拌和边滴入HCl，用pH计测量水溶液pH值至需要的pH值，随后再放水进来就可以 。
【磷酸盐缓冲液当流动相要过膜吗】磷酸盐缓存溶液的配制方式：称NaCl，KCl，KH2PO4和K2HPO4，溶解800ML纯净水中，用HCl调整水溶液的pH值至7.4，最终加纯净水定容至1L 。储存于4℃电冰箱中就可以 。必须留意的是，一般 常说的浓度值指的是缓冲液中全部的磷酸根浓度值，并非Na+或K+的浓度值，Na+和K+仅仅用于调整渗透浓度的 。配备磷酸盐缓冲液时无机盐比醋酸盐好，醋酸盐在超低温下不易融解，而钾盐的溶解度相对性高一些 。
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