如何选择二抗——根据一抗种属及类型选择合适的二抗求解( 二 )


第一抗体就是平常所说的抗体,即能和抗原特异性结合 。第二抗体是能和抗体结合的,即抗体的抗体 。主要用于检测抗体的存在 。一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体 。即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体 。
【一抗的种属来源】
二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源,例如:如果你的一抗是小鼠源的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗(山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可);如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体,则相应的二抗需要选择抗兔的二抗 。
即根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗 。艾美捷能为您提供最全的抗不同种属的原装进口二抗,包括抗小鼠、大鼠、兔、山羊、绵羊、人、豚鼠、猪、马、牛、鸡、鸭等二抗 。
【二抗的种属来源】
【如何选择二抗——根据一抗种属及类型选择合适的二抗求解】一般来说,不同的种属来源与二抗的质量没有必然的联系,来源于山羊的二抗与来源于驴的二抗在一般的实验里没有太多的差别 。
然而在一些特殊的实验里,如双标实验里,如果其中一个一抗是山羊来源的,一个是小鼠来源的,则相应的二抗分别要抗山羊和抗小鼠的二抗,这时候,二抗就不能选择山羊或者小鼠来源的 。艾美捷有相应的驴来源的二抗,非常适合做类似双标的免疫实验 。
一抗一般选择兔来源的抗体,兔来源的抗体要稳定一些,二抗是根据一抗来定的,而且比较便宜,一般抗兔、抗小鼠都会备一点 一抗选择原则:
1.
先查一下该抗体的相关专业外文文献,先看看前人一般选择哪家公司的哪种抗体较多,且一定要根据期刊质量和图片结果好坏综合判断,提供参考
2.
若未找到相关文献或查到的文献信息不详等原因,也可以通过公司查找,如Santa Cruz、CST、abcam、chemicon、upstate、millipore等知名品牌公司 。其中磷酸化抗体优先考虑CST公司
3.
种属反应性的选择(species reactivity):对应抗体适合检测哪种种属动物体内的抗原,如Mouse、Rat、Human等 。
4.
应用范围的选择:是用于Western blotting,或免疫组化IHC、免疫荧光IF

推荐阅读