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回答1、方法：准备好镊子、EP管、枪头等工具 ， 并进行杀菌处理；手和镊子用酒精擦拭消毒，用镊子取出约10支的EP管放到试剂盒里；找到移液枪，取出50%的甘油（等体积蒸馏水加等体积甘油，甘油需要慢慢吸）放到EP管里面，再取出菌种放到EP管里面；最后把所有的菌种都装入到一个大袋子里盖好盖子标注好保存起来 ， 放入-20℃的冰箱里保存 。2、温度要求：长期保存，建议在-70℃下冻存；短期保存 ， 可在-20℃保存 。
一、甘油保存菌种的方法
1、原料/工具
甘油、镊子、EP管、移液枪 。
2、方法/步骤
（1）准备工具并杀菌：准备好镊子、EP管、枪头等工具，把这些工具放到高压灭菌的锅里进行杀菌 。
（2）把EP管放入试剂盒：用酒精将手和镊子擦拭消毒，用镊子取出约10支的EP管放到试剂盒里 。
（3）把甘油和菌种放入EP管：找到移液枪，取出50%的甘油（甘油稀释至50%浓度的方法：等体积蒸馏水加等体积甘油 ， 甘油需要慢慢吸）放到EP管里面，再取出菌种放到EP管里面 。
【甘油保存菌种的方法，保存菌种的温度】 （4）保存并放入冰箱：把所有的菌种都装入到一个大袋子里盖好盖子标注好保存起来，放在-20℃的冰箱里保藏 。
二、甘油保存菌种的温度
1、甘油保存菌种，若是长期保存，建议在-70℃下冻存 ， 保藏时间一般为2-4年左右；在-20℃保存时间较短，通常只有1年左右 。目前实验室大都采用-80℃（-70℃）冰箱保藏 。
2、甘油冷冻保藏菌种是目前实验室应用最为广泛的一种的菌种保藏方法，原理是以甘油为保护剂，低温冷冻条件下，使微生物的新陈代谢趋于停止，从而达到长期有效的保藏 。一般来说，保藏温度越低，保藏效果越好 。这种方法适用于一般细菌的保存，同时也适用于链球菌、弧菌、真菌等需特殊方法保存的菌种 。
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