抗体稀释液(如何选择抗体稀释液?)
在IHC实验中 , 有几个关键步骤会影响你的实验结果 。我们将重点关注抗体稀释液 。
合适的抗体稀释液有多重要?
使用适合您特定抗体的抗体稀释液非常重要 。稀释剂的pH值和离子强度的差异会增强或减弱抗体与靶标的特异性相互作用 。此外 , 稀释剂特性可能影响与非靶分子的非特异性相互作用和抗体稳定性 。理想的抗体稀释液支持抗体表位的相互作用和特异性 , 最终支持您的染色强度 。因此 , 当你的实验信号较低时 , 可以先检查抗体稀释液是否合适 。
添加血清蛋白作为稳定剂 , 优化pH值可以克服上述问题 。
如何找到特异性抗体的抗体稀释液?
对于其CST已通过IHC实验验证的抗体 , 应一起使用的稀释剂将在相应产品页面的IHC实验步骤部分进行推荐 。
signal染色剂稀释剂可用于所有CST抗体?
信号染色抗体稀释液# 8112 IHC抗体稀释液确实适用于IHC验证的多种抗体 , 但并不适用于每一种抗体 。对于IHC验证的某些CST产品 , 当使用替代稀释剂(如TBST+5%正常山羊血清)时 , 可能会获得更强的信号 。详见相应产品的“实验步骤”(如下图) 。
如果使用推荐稀释剂以外的稀释剂会发生什么?
对于不同的原生阻力 , 情况是不同的 。我们发现用不同稀释度的一级抗体稀释的一些CST抗体的敏感性是相似的 。然而 , 一些抗体对一种稀释剂比其他稀释剂更敏感 。
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