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胶体金检测方法

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胶体金检测方法

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胶体金检测方法如下：
胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，可聚合成一定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，形成带负电的疏水胶溶液，由于静电作用而成为稳定的胶体状态，故称胶体金 。
胶体金在弱碱环境下带负电荷，可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合，由于这种结合是静电结合，所以不影响蛋白质的生物特性 。
胶体金除了与蛋白质结合以外，还可以与许多其它生物大分子结合，如SPA、PHA、ConA等 。
由于胶体金具备这个特性，所以常用来检测，所以成为了一种检测方法，用胶体金法命名 。比如吗啡检测试纸（胶体金法）的原理：本品采用胶体金免疫层析技术，将吗啡抗原包被在硝酸纤维薄膜上，在玻璃纤维上包被胶体金标记的特异性抗体 。
在检测时，如样本中没有吗啡或其代谢产物存在，胶体金标记的特异性抗体与膜区抗原结合形成两条红线（一条反应线T，一条质控线C），表明检测结果为阴性；
【胶体金检测方法】如样本中存在吗啡或其代谢产物，而且浓度高于检测水平（300ng/ml）时，毒品分子就与胶体金标记的抗体竞争结合，从而阻止胶体金标记的抗体与膜区抗原结合，使其对应的红色反应线消失，仅出现一条红色的质控线，表明检测结果为阳性 。
金溶胶又称胶体金，是金盐被还原成金单质后形成的稳定、均匀、呈单一分散状态悬浮在液体中的金颗粒悬浮液 。金溶胶颗粒由一个金原子及包围在外的双离子层构成 。
溶胶的颜色取决于分散相物质的颜色、分散相物质的分散度和入射光线的种类，是散射光线还是透射光，粒子越小，分散度越高，则散射光的波长越短 。对同一种物质的水溶胶来说，粒子大小不同，呈现的颜色亦不同 。
如胶体金颗粒在5～20nm之间，吸收波长520nm，呈红色的葡萄酒色；20～40nm之间的金溶胶主要吸收波长530nm的绿色光，溶液呈深红色；60nm的胶体金溶胶主要吸收波长600nm的橙黄色光，溶液呈蓝紫色 。一般应用于免疫组织化学的胶体金颗粒为5～60nm范围内，溶液呈现红色 。
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扩展资料：
常用的免疫胶体金检测技术：
1、免疫胶体金光镜染色法细胞悬液涂片或组织切片，可用胶体金标记的抗体进行染色，也可在胶体金标记的基础上，以银显影液增强标记，使被还原的银原子沉积于已标记的金颗粒表面，可明显增强胶体金标记的敏感性 。
2、免疫胶体金电镜染色法可用胶体金标记的抗体或抗抗体与负染病毒样本或组织超薄切片结合，然后进行负染 。可用于病毒形态的观察和病毒检测 。斑点免疫金渗滤法
3、应用微孔滤膜（如膜）作载体，先将抗原或抗体点于膜上，封闭后加待检样本，洗涤后用胶体金标记的抗体检测相应的抗原或抗体 。
4、胶体金免疫层析法将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上，胶体金标记试剂（抗体或单克隆抗体）吸附在结合垫上，当待检样本加到试纸条一端的样本垫上后，通过毛细作用向前移动 。
溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应，当移动至固定的抗原或抗体的区域时，待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留，聚集在检测带上，可通过肉眼观察到显色结果 。该法现已发展成为诊断试纸条，使用十分方便 。
参考资料来源：/baike.baidu.com/item/%E9%87%91%E6%BA%B6%E8%83%B6"target="_blank"title="网页链接">百度百科——金溶胶
抗原检测胶体金法原理解释如下：
胶体金溶液是指分散相粒子直径在l—150 nm之间的金溶胶，属于多相不均匀体系，颜色呈桔红色到紫红色．胶体金作为标记物用于免疫组织化学始于1971年,Faulk等应用电镜免疫胶体金染色法(IGS)观察沙门氏菌,此后他们把胶体金与多种蛋白质结合.1974年Romano等将胶体金标记在第二抗体（马抗人IgG）上，建立了间接免疫胶体金染色法 。
1978年geoghega发现了胶体金标记物在光镜水平的应用 。胶体金在免疫化学中的这种应用，又被称为免疫金．之后，许多学者进一步证实胶体金能稳定又迅速地吸附蛋白质，而蛋白质的生物活性无明显改变．它可以作为探针进行细胞表面和细胞内多糖、蛋白质、多肤、抗原、激素、核酸等生物大分子的精确定位,也可以用于日常的免疫诊断，进行免疫组织化学定位 。

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