蛋白质检验 蛋白质的检测


蛋白质检验 蛋白质的检测

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小伙伴们好,最近小龙发现有诸多的小伙伴们对于蛋白质检验这个都颇为感兴趣的,那么小龙今天就来为大家梳理下具体的一些信息一起来看看吧 。
1、凯氏定氮法
2、凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮含量的方法 。即在催化剂的存在下,样品中的有机氮用浓硫酸消化转化为无机铵盐,然后铵盐在碱性条件下转化为氨,用水蒸气蒸馏出来,用过量的硼酸溶液吸收,再用标准盐酸滴定 , 计算出样品中的氮含量 。
3、因为蛋白质中的氮含量是相对恒定的,所以可以从其氮含量计算出蛋白质的含量,所以这种方法是一种经典的蛋白质定量方法 。
4、缩二脲法
5、缩二脲法是一种用于鉴定蛋白质的分析方法 。缩二脲试剂是一种碱性含铜试液,呈蓝色,由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制而成 。
6、当底物含有肽键(多肽)时,试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色 。浓度可通过比色法分析 , 紫外-可见光谱中的波长为540nm 。识别反应的灵敏度为5-160毫克/毫升 。反应蛋白单位为1-10毫克 。
7、苯酚试剂法
8、取6支试管 , 分别贴上标签 。前五个试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液 。最后一个试管加入待测蛋白溶液 , 没有标准蛋白溶液 。在室温下放置30分钟 。以第一个不含蛋白溶液的试管为空白对照 , 在650nm波长处测量每个试管中溶液的吸光度 。
9、紫外线吸收法
10、大多数蛋白质在280nm波长处具有特征性的最大吸收,这是由于蛋白质中存在酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸 。可用于测定0.1 ~ 0.5 mg/ml蛋白质溶液的含量 。
11、取9支试管,分别贴上标签 。前8个试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液,第一个试管不加入标准蛋白溶液,最后一个试管加入待测蛋白溶液,不加入标准蛋白溶液 。每个试管中的液体总量是通过加入蒸馏水来弥补而保持一致的 。将液体混合均匀,在280nm波长下进行比色分析,记录吸光度值 。
12、科斯亮蓝法
13、考马斯亮蓝显色法的基本原理是蛋白质能与考马斯亮蓝G-250定量结合 。考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合后 , 其可见光最大吸收峰从465nm变为595nm 。
14、当考马斯亮蓝G-250的浓度过量且恒定时,当溶液中蛋白质的浓度不同时 , 不同量的考马斯亮蓝G-250会从465nm的吸收峰形式变为595nm的吸收峰形式,这种变化有一定的定量关系 。
15、一般来说,当溶液中蛋白质的浓度增加时,显色溶液在595nm处的吸光度基本上可以线性增加 。因此,考马斯亮蓝G-250显色法可用于测定溶液中蛋白质的含量 。
【蛋白质检验 蛋白质的检测】本文到此结束 , 希望对大家有所帮助 。

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