酶切时所加的DNA 溶液体积不能太大,否则DNA 溶液中其他成分会干扰酶反应 。
酶活力通常用酶单位(U)表示,酶单位的定义是在最适反应条件下,1 小时完全降解1 mg λDNA 的酶量为一个单位,但是许多实验制备的DNA 不象λDNA 那样易于降解,需适当增加酶的使用量 。反应液中加入过量的酶是不合适的,除考虑成本外,酶液中的微量杂质可能干扰随后的反应 。
扩展资料:
【dna琼脂糖凝胶电泳条带分析】注意事项:
在一个或几个孔中加入标准分子质量样品,电泳结束后,根据已知分子质量的带的相应位置可用来做出标准曲线 。
电泳一般是在追踪染料泳动到胶的80%部位时停止 。注意电泳期间,电泳槽盖要安全盖好,以防止液体蒸发,又可以降低电击的可能性 。
电泳结束后,将胶浸没在1mg/L的溴化乙锭(EB)中,5min后即可看到DNA带,EB通过插入在双螺旋的配对核苷酸之间同NDA结合 。另一种方法是电泳时,在胶中加入EB 。
参考资料来源:百度百科-琼脂糖凝胶电泳
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